第一章　血片制备

制备合格优质的血涂片，是观察血细胞形态，血片分类和复检血涂片的重要一步。

所需要的材料：清洁且无油脂的载玻片；边缘光滑的推片，推片应小于载玻片的宽度，或下端有内向的切角；毛细管或塑料滴管。

1.用毛细管或塑料吸管吸取EDTA抗凝的外周血4～6μl，或者直接采集患者末梢血，将血滴滴至载玻片的一端约3/4处，有磨砂片头的玻片，可在接近磨砂片头的部位（图1-1）。

2.将推片接近血滴处，然后轻轻接触血滴并压在血滴上，使血液呈”一”字型展开，充满推片宽度（如果能做到边缘血量较少，中间血量稍多为最佳）（图1-2，图1-3）。

3.将推片与载玻片形成30°夹角，见图1-4，用均匀的速度将血向载玻片的另一端（尾部）推动。红细胞压积（HCT）发生变化时，应适当的调整推片与载玻片的角度（30°～45°）以及推动血液时的速度（图1-5）。HCT越高，角度越小，速度越慢；HCT越低，角度越大，速度越快。这样才能做到推制出的血涂片薄厚适中，油镜观察区域的血细胞形态舒展且分布均匀。标准的血涂片应做到头、体、尾分明，两边和两端留有空隙（图1-6）。

4.推制好的血涂片迅速干燥。如果实验室所处地区空气湿度较大，可使用电风扇风干（切忌使用电吹风，以免过烫）。

5.如果载玻片有磨砂边，应标注该标本的患者姓名或编码。如果载玻片没有磨砂边，则用铅笔将该标本的患者姓名或编码写在血膜头部的最厚处。

6.有条件的单位，还可采用全自动血细胞分析仪流水线系统配备的制片染片机，制备标准的血涂片，其操作可参考仪器说明书或实验室SOP文件。仪器可将患者的编号、ID号或二维码打印在特定区域，以方便样本识别。图1-7为某品牌流水线上的血涂片染片机，图1-8为仪器制备的血涂片。

7.还可使用半自动小型推片机制备血涂片（图1-9），该小型设备可一次性制备两张血涂片。①将玻片放置在推片机上，将5μl血液滴在玻片指定位置（图1-10）；②向下压手柄，使得推片接触血滴，并使血滴呈一字型展开（图1-11）；③松开手柄，推片向前移动，同时将血片推制好（图1-12）；④完成一组血片推制后，应使用沾有盐水的棉签将推片上沾染的血液擦拭干净。

8.血涂片各种效果和质量分析 进行细胞分类计数、形态观察、能否在血涂片中的某个部位查找到有价值的信息，这都与血涂片制备的优劣有很大关系。

图1-13中所示八种血涂片的优劣点分析如下：①这是一张头、体、尾分明，薄厚适中，两边、两端均留有空隙的标准血涂片；②血膜太短，体、尾交界处不分明，进行白细胞分类计数时，细胞形态不舒展，造成细胞形态不易辨认；③血膜头、体、尾不分明，薄、厚不均，且没有尾部，这样的血膜会造成细胞分布不均匀，很大程度上影响白细胞分类计数，体积较大的细胞，或者会对血常规结果造成影响的有价值的信息也不易查找到，这样的血涂片根本不能使用；④这张血涂片两边没有空隙，体积较大的细胞和有价值的信息也容易出现在血膜两边，不利于观察该部位；⑤血膜太薄，细胞密度小，白细胞分类计数时就要耗费更多的时间；⑥血膜太厚，细胞密度大，这种情况下，体尾交界处的细胞经常会叠摞在一起，难以细致的观察各种细胞形态；⑦“搓板”样的血涂片，在这样的血膜中，细胞分布不均，白细胞分类计数的结果会受到很大的影响，也属于不能使用的血涂片；⑧血膜略有倾斜，显然是操作人员推片时，手上力度不均匀造成的，这样的血膜对于血涂片复检，结果不会受到太大的影响，但血膜的外观不能达到完美。